作者:张晶晶 薛江义 刘云峰 章毅 杨静小鼠胰岛脂联素脂联素受体葡萄糖刺激的胰岛素分泌
摘要:目的观察脂联素干预后小鼠葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)的变化。方法分离获得原代小鼠胰岛,使用胶原酶Ⅴ消化小鼠胰腺,反复过滤离心后体式显微镜下手工挑取胰岛;胰岛的纯度采用双硫棕(DTZ)染色法鉴定;采用RTPCR的方法检验小鼠胰岛细胞表面脂联素受体(AdipoR)的表达;分为溶剂对照组(Con组)和脂联素组(Ad组),观察脂联素干预后小鼠胰岛在低糖(LG)和高糖(HG)刺激下胰岛素分泌的变化。结果该方法获得的胰岛外形饱满,状态良好;胰岛细胞表面AdipoR1及AdipoR2的表达分别为0.56±0.08、0.32±0.03,P〈0.05;使用脂联素干预后,体外刺激胰岛素分泌实验,测得胰岛素含量使用胰岛素总量标化后分析得到:低糖时Ad组胰岛素总量(0.01410±0.00088)低于低糖时Con组(0.01470±0.00110),差异无统计学意义;高糖时Ad组胰岛素总量(0.04420±0.00408)显著高于高糖时Con组(0.03150±0.00274)及低糖时Ad组,P〈0.05;高糖时Con组胰岛素总量显著高于低糖时Con组,P〈0.01。结论使用胶原酶Ⅴ消化获得的小鼠原代胰岛纯度高、活性好;小鼠胰岛细胞表面有AdipoR的表达;低糖情况下,脂联素对胰岛素分泌无明显影响,高糖刺激下,脂联素对胰岛素分泌有促进作用。
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