作者:曹志勇 董瑞国缺氧复氧星形胶质细胞谷氨酰氨合成酶亚低温兴奋性氨基酸转运体2
摘要:目的对体外培养的星形胶质细胞(AC)进行缺氧/复氧及亚低温干预。观察兴奋性氨基酸转运体2(EAAT2)、谷氨酰胺合成酶(GS)的表达及亚低温干预对其的影响。方法选用新生大鼠的大脑皮层组织培养的AC。分为对照组(C)、缺氧/复氧组(H/R)、亚低温组(H/M+R),缺氧12h后H/R组及H/M+R组分别于37℃及32℃复氧。每组设复氧2h、4h、8h、12h、24h、48h等时间点。MTT测定细胞活力,Western—blot半定量分析EAAT2、GS的表达情况。结果①MTT法检测细胞活力:H/R组与H/M+R组的细胞活力均比C组的细胞活力低,而H/M+R组的细胞活力较H/R组高,差异有统计学意义(P〈0.05)。(2)Western—blot检测结果:H/R组与H/M+R组的EAAT2表达与C组相比较,均先减少,后随着复氧时间延长逐渐增多,差异有统计学意义(P〈0.05),H/M+R组的EAAT2表达与H/R组相比较,表达量下降趋势小,差异有统计学意义(P〈0.05);H/R组与H/M+R组的GS表达量随着复氧时间延长。均呈现增高趋势,与C组比较增高显著,差异有统计学意义(P〈0.05),H/M+R组的GS表达量与H/R组比较增高趋势更加明显,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论缺氧/复氧及亚低温干预可引起星形胶质细胞EAAT2、GS表达的改变:32℃~35℃亚低温干预可以抑制缺氧/复氧损伤后兴奋性氨基酸的释放,这可能是脑保护作用的重要机制之一。
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