作者：陈月琴 宋国华 冯龙 赵国强 董子明突变切除修复
摘要：目的分析162位Val→Ala突变型DNA聚合酶β（DNA polymerase β，polβ）碱基切除修复活性的变化，为探讨修复基因DNA聚合酶β突变在肿瘤发生发展中的作用积累实验依据。方法异丙基-β—D-硫代半乳糖苷（IPTG）分别诱导含有野生型和162位Val→Ala突变型DNA聚合酶β表达载体（pQE80L—Wpolβ和pQE80L-Mpolβ）的大肠杆菌DH5α；通过镍柱亲和层析法纯化蛋白，复性后蛋白定量；退火合成含有单碱基缺失的DNA底物，与纯化的野生型和突变型DNA聚合酶β蛋白进行BER修复试验。结果通过诱导、纯化得到38kd野生型和突变型DNA聚合酶β蛋白；在BER实验中。野生型DNA聚合酶β能够在DNA底物的酶切位点处将其完全切开，而突变型DNA聚合酶β仅部分将其切开。结论162位Val→Ala突变型DNA聚合酶β碱基切除修复能力显著减弱，提示肿瘤发生发展与polβ基因修复活性降低密切相关。
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