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可溶性支架转染c-myc基因反义寡核苷酸对静脉桥c—myc基因mRNA表达的影响

作者:孙宏涛; 吴清玉; 许建屏可溶性支架反义寡核苷酸

摘要:目的选择c—myc为靶基因,在兔颈总动脉颈外静脉移植模型中采用可溶性支架将反义c—myc寡核苷酸转染静脉桥,旨在从核酸mRNA水平明确c—myc基因在静脉桥再狭窄机制中的作用。方法新西兰大耳白兔随机分成5组,每组10只动物。①空白对照组;②单纯可溶性支架组;③正义寡核苷酸可溶性支架组;④反义寡核苷酸可溶性支架组:⑤不匹配寡核苷酸可溶性支架组。建立兔颈外静脉颈总动脉旁路移植术模型,合成c—myc寡核苷酸,处理可溶性支架.依组别不同,在静脉移植时静脉桥管腔内分别置入:①空白对照;②单纯可溶性支架;③反义寡核苷酸可溶性支架;④正义寡核苷酸可溶性支架;⑤不匹配寡核苷酸可溶性支架;于颈外静脉移植后7天、28天和90天取出静脉桥。采用原位杂交及Northern Blot,半定量及定量地检测各组静脉桥中c—myc基因mRNA表达水平。结果原位杂交:同时间段反义寡核苷酸组细胞胞浆与胞核内c—myc基因mRNA的表达明显降低,其他各组静脉桥c—myc基因mRNA强烈表达,斑点杂交及Northern杂交印迹扫描数值显示7天、28天、90天空白对照组、空白支架组、正义组、错配组RNA的表达显著强于同时间点的反义寡核苷酸组RNA表达水平,而同时间点除外反义寡核苷酸可溶性支架组的其他各组之间无差异。结论可溶性支架转染c—myc基因反义寡核苷酸可显著抑制移植物内c—myc基因的表达。

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