作者：居颂光; 居颂文; 傅晋翔; 仇红霞; 王明元...fl转基因细胞白血病细胞株u937细胞促增殖效应fl细胞体外刺激膜型逆转录病毒表达载体白血病细胞株l929细胞
摘要：目的构建稳定表达人膜型FL分子的转基因细胞株,观察膜型FL和可溶性FL对单核细胞性(M5型)白血病细胞株的体外促增殖效应.方法利用PCR方法克隆人FL全长基因,继而重组入逆转录病毒表达载体pEGZ-Term,转染包装细胞293T,用含有完整重组逆转录病毒颗粒的293T细胞培养上清感染L929细胞,筛选获得Zeocin抗性的转基因细胞.采用RT-PCR和流式细胞仪表型分析等方法进行鉴定.MTT法分析了L929/FL细胞和可溶性FL体外刺激U937细胞的增殖效应.结果成功构建了稳定表达人膜型FL的转基因细胞L929/FL,膜型FL在体外能够有效促进U937细胞增殖,而可溶性FL并不能有效促进U937细胞的体外增殖.结论成功构建了稳定表达人膜型FL的转基因细胞,并且提示膜型FL在白血病发病机理中可能具有重要作用.
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