作者:汪明振; 邱成志; 余外市; 王春晓; 郭延塔人结肠癌细胞高尔基相关蛋白34wnt信号通路增殖
摘要:目的 探讨人结肠癌细胞中高尔基相关蛋白34(GPP34)基因高表达,激活经典Wnt信号通路,促进癌细胞增殖的机制。方法 将SW620结肠癌细胞株分为4组:对照组、siRNA转染组、Tricinbine组及TWS119组,分别培养;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测结肠癌细胞转染后的沉默效果;分别用Topflash报告基因活性法、噻唑蓝(MTT)、流式细胞技术检测各组癌细胞Wnt信号通路活性、生长抑制率、细胞凋亡率;Western blot检测各组结肠癌细胞中GPP34、β-catenin、p S9-糖原合酶激酶-3β(p S9-GSK-3β)蛋白的表达。结果 转染siRNA后,沉默结肠癌细胞GPP34表达效果佳;与对照组比较,各实验组癌细胞的生长抑制率和凋亡率升高,且Wnt信号通路活性抑制。Western blot检测结果显示,siRNA-GPP34组GPP34蛋白表达下降,其余两组GPP34蛋白表达比较,差异无统计学意义;siRNA转染组、Tricinbine组和TWS119组的β-catenin和p S9-GSK3β蛋白表达降低。结论 SW620结肠癌细胞中GPP34基因的高表达可通过激活经典Wnt细胞信号通路,促进癌细胞增殖并抑制其凋亡。
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