作者：赵亚; 李英辉; 刘忠湘; 黄豫晓; 雷俊川; ...肽库逆转录病毒电击转化
摘要：目的建立可表达随机12肽库的逆转录病毒初级文库的构建方法并优化其实验参数。方法体外合成可编码随机12肽的DN段。将该DN段克隆入带有EGFP标记的逆转录病毒载体pQCX—IX—EGFP，连接产物电击转化大肠杆菌，转化所得菌液即为可表达随机12肽库的逆转录病毒初级文库，其间通过大量的实验优化：插入片段与载体的摩尔比、连接反应的条件、连接产物的DNA浓度以及电击转化参数等关键的实验参数。结果按照本研究所确立的方法和最佳实验参数构建的可表达随机12肽库的逆转录病毒初级文库的滴度为2．85×10^5cfu／mL，成功转化子的比例接近100％，编码随机12肽的DNA序列正确率为83％。结论成功建立了可表达随机12肽库的逆转录病毒初级文库的构建方法，并确定了最佳的实验参数，为后续的可表达随机12肽库的逆转录病毒表达系统的建立奠定了良好的基础。
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