作者：桂乐; 吴翔; 秦小同; 魏美芳; 景宏美; 刘...遗传性长qt综合征herg真核表达载体基因转染
摘要：目的构建HERG基因的真核表达载体，并在人胚胎肾细胞（HEK293）中进行表达。方法先将pGH19-HERG通过限制性酶SacⅠ和EcoR Ⅰ酶切得到HERG cDNA，将pIRES2-EGFP用SacⅠ和EcoRⅠ进行双酶切，把HERGcDNA定向克隆到pIRES2-EGFP中，即构建了HERG基因的真核表达载体pIRES2-EGFP—HERG。然后利用电穿孔法将pIRES2-EGFP-HERG转染HEK293细胞。结果在卵母细胞异源表达载体pGH19-HERG基础上，获得了真核表达载体pIRES2-EGFP—HERG，并在HEK293细胞中成功进行了表达。结论在HERG基因卵母细胞异源表达载体的基础上，构建了HERG基因的真核表达载体piRES2-EGFP-HERG，利用电穿孔法将其转染至HEK293细胞中并成功地进行了表达，为下一步进行膜片钳的研究奠定基础。
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