作者：罗惠莉; 李红发沙眼衣原体热休克蛋白10基因真核表达载体基因表达
摘要：目的从临床标本中获得沙眼衣原体（Ct）热休克蛋白（cHSP）10基因，构建真核表达重组质粒。利用脂质体体外转染Hela细胞，为研究cHSPl0生物学功能和Ct核酸疫苗的研制做准备。方法用PCR技术从40例金标法阳性的临床标本中扩增cHSP10基因片断，重组入pMD18-T克隆载体。将pMD18-T／cHSP10外源基因片断经酶切鉴定后。克隆入pcDNA3．1（＋）中，经过序列分析和酶切鉴定后，运用脂质体将该重组体转染Hela细胞。ELISA方法观察目的基因的表达。结果PCR扩增得到cHSP基因全长。大小为306bp，序列测定与GmxBank（M58027）的序列一致；构建得到cHSP10基因真核表达载体；该真核表达载体在Hela细胞表达cHSP10。结论成功构建cHSP10基因真核表达载体，该重组质粒能在Hela细胞中表达cHSP10，为进一步研究cHSP10生物学功能和Ct核酸疫苗的研制提供了实验基础。
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