作者：吴国伟; 龚光甫; 胡型锑; 王胜利; 杨美高混合醇牛心包戊二醛细胞毒性
摘要：目的研究混合醇改性对戊二醛牛心包细胞毒性的影响;并验证0.3%戊二醛保存对改性后的戊二醛牛心包细胞毒性有无影响.方法取新鲜牛心包心前区部分,分三组处理:A组:用0.625%戊二醛固定两周后用0.3%戊二醛保存;B组:牛心包用0.625%戊二醛固定二周后,用混合醇后处理并保存;C组:将B组心包在混合醇中处理2个月后,转入0.3%戊二醛中保存.D组:用玻片作为对照组.将三种心包切成同样大小(2×2cm2),用生理盐水分别漂洗10 min 3次.然后分别种植同样数目的(4×104)人胚肺成纤维细胞,培养7 d后,将细胞洗下来,0.4%台盼兰染色,计算每片心包上的活细胞数.同时对心包片细胞作光镜及扫描电镜(SEM)观察.结果4个组活细胞计数结果:三组心包片上的活细胞数分别为:A组(戊二醛牛心包):(5.83±2.04)×103;B组(混合醇改性戊二醛牛心包):(16.67±2.04)×103;C组(0.3%戊二醛保存的混合醇改性牛心包):(18.75±1.12)×103.与对照组[(176.25±18.15)×103]相比,三种心包均对细胞增殖有不同程度的抑制.混合醇改性后(B、C组)与未改性戊二醛牛心包(A组)的活细胞数有显著性差异(P＜0.001),而B组与C组无显著性差异(P＞0.05);光镜细胞形态学观察:对照组细胞生长良好,且形态正常,无死亡细胞.细胞计数时见A、B、C三组均有死亡细胞,尤以A组最多;扫描电镜观察:A组细胞较少,且多为圆球形细胞,大部分为裸露的胶原纤维;B、C组均有较多的细胞覆盖生长,细胞展开,可见细胞分裂相.结论经混合醇处理后的戊二醛牛心包细胞毒性明显降低,但仍有细胞毒性;混合醇改性后的戊二醛牛心包保存在0.3%戊二醛溶液中,其细胞毒性无明显改变.
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