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微小RNA-200a对肺癌细胞增殖影响及抑癌基因功能分析

作者:谢悦; 董礼文; 王军; 李雄伟肺癌yap1细胞增殖

摘要:目的 分析miRNA-200a对肺癌细胞增殖影响及抑癌基因功能影响。方法 Real-time PCR对正常肺支气管上皮细胞16HBE、肺癌细胞SK-MES-1、NCI-H520、A549及25例非小细胞癌癌旁组织与癌组织内miR-200a表达量检测,CCK-8法检测肺癌A549细胞增殖活性受miRNA-200a影响状况,生物信息学对miRNA-200a靶基因进行预测,双荧光素酶联合Western blot及Real-time PCR检验YAP1受miRNA-200a调控影响。CCK-8法检测肺癌549细胞受YAP1增殖影响。结果 肺癌细胞株SK-MES-1、NCI-H520及A549内miR-200a表达量均低于正常细胞株16HBE,差异有统计学意义(P〈0.05)。miR-200a mimics组内A549细胞在48、72及96 h时其吸光度均低于Mimics-NC,差异有统计学意义(P〈0.05)。肺癌A549转染siRNA-NC或者siRNA-YAP1后,PCR检测显示siRNA-YAP1内YAP1 m RNA表达量为(0.37±0.06),siRNA-NC内YAP1 mRNA表达量为(1.03±0.07),差异有统计学意义(P〈0.05);Western blot显示siRNA-YAP1内YAP1蛋白表达量比siRNA-NC低;siRNA-YAP1内YAP1细胞吸光度在48、72及96 h时均低于siRNA-NC,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 miR-200a对肺癌细胞增殖的抑制作用主要是经过靶向作用YAP1基因来实现的,进而在肺癌内起到抑癌功能。

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