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7株不同原核质粒表达丙型肝炎核心蛋白的差异研究

作者:汪明珊; 颜学兵; 周林福; 李杨霞丙型肝炎病毒核心蛋白质粒构建

摘要:目的通过比较不同原核质粒表达丙型肝炎核心蛋白(CORE)的差异,筛选出能高效表达CORE的原核质粒。方法用PCR扩增并获得CORE基因,扩增产物分别构建到7种不同原核表达质粒中,重组质粒用IPTG诱导表达,聚丙烯凝胶电泳(SDS—PAGE)初步鉴定表达产物,并经Western blot验证。结果PCR及双酶切验证表明CORE基因成功构建到7种原核质粒中,SDS—PAGE验证各融合质粒表达目的蛋白存在差异,其中pTrc—CKS—CORE及Pmbp—C—CORE可见相应的融合蛋白表达,以pTrc—CKS—CORE表达量高,表达产物经Western blot验证表达成功。结论成功构建7株不同CORE原核表达质粒,各融合质粒表达CORE存在较大差异,筛选出高表达CORE质粒,为下一步研究奠定基础。

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中国现代医生

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