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重组人SPARC蛋白对SKM-1细胞生物活性的研究

作者:潘晖; 周晓佳; 王利继发性髓系白血病骨髓增生异常综合征sparc阿糖胞苷hek293f表达体系

摘要:富含半胱氨酸的酸性分泌性糖蛋白(secreted protein acidic and rich in cysteine, SPARC)在疾病细胞衰老过程中具有复杂且多效的生物学作用。然而, SPARC在继发性急性髓性白血病(secondary acute myeloid leukemia, sAML)中的作用尚未完全阐明。该研究旨在探讨人重组SPARC(rh-SPARC)对sAML的生物学及免疫调节相关作用。差示扫描量热法、CCK-8法、流式细胞术、蛋白质印迹分析(Western blot)和等温滴定量热法(isothermal titration calorimetry, ITC)等评估rh-SPARC的特征和生物活性。结果表明, rh-SPARC蛋白以浓度依赖性方式抑制SKM-1而非K562细胞的增殖于细胞周期G0/G1期。rh-SPARC和Ara-C联合使用对SKM-1的增殖抑制更显著。ITC结果显示, rh-SPARC和Ara-C之间没有直接的相互作用。Western blot结果显示, rh-SPARC和Ara-C联合作用显著降低SKM-1中pAkt的相对表达水平。以上结果表明, rh-SPARC对白血病细胞具有选择抑制性, rh-SPARC和Ara-C之间存在协同作用, rh-SPARC通过降低Akt磷酸化,以增强SKM-1对Ara-C的敏感性。

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中国细胞生物学学报

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