作者：姚欢; 潘华锋; 郑妍; 章杰; 李娅莎; 吴梦...低强度脉冲超声人牙髓间充质干细胞trpm7成骨分化
摘要：该文主要研究低强度脉冲超声（low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS）促进牙髓间充质干细胞（dental pulp mesenchymal stem cells,DPSCs）成骨分化,以及瞬时受体电位M7（transient receptor potential melastatin 7,Trpm7）在其中发挥的作用。培养人DPSCs,流式细胞术检测其表面分子标志表达,阿利新蓝、茜素红及油红O染色检测其成软骨、成骨和成脂分化能力。ALP活性、ALP染色和茜素红染色观察LIPUS促成骨分化的能力。实时定量PCR检测LIPUS处理组与对照组成骨分化相关基因OPN、OCN、RUNX2表达的差异以及不同时间点两组Trpm7 m RNA表达水平的变化。ALP活性检测LIPUS及不同浓度Trpm7抑制剂2-氨基乙酯二苯基硼酸（2-aminoethoxydiphenyl borate,2-APB）对成骨分化能力的影响。实验分为对照组、LIPUS组、LIPUS＋二甲基亚砜（DMSO）组和LIPUS＋2-APB组,ALP和茜素红染色观察各组成骨分化能力,Western blot检测各组OPN、OCN和RUNX2的蛋白表达。结果显示,成功培养DPSCs,LIPUS处理后ALP和茜素红阳性染色明显增多,ALP活性增强（P〈0.01）;OPN、OCN、RUNX2的m RNA表达水平显著增加（P〈0.05）,LIPUS处理第2天和第5天Trpm7的m RNA表达水平有明显升高（P〈0.05）。2-APB作用后明显下调ALP活性（P〈0.01）。LIPUS组、LIPUS＋DMSO组与对照组相比,ALP和茜素红阳性染色以及OPN、OCN与RUNX2的蛋白表达均显著增加,而LIPUS＋2-APB组较于LIPUS＋DMSO组,ALP和茜素红染色以及OPN、OCN与RUNX2的蛋白表达明显降低。该研究结果提示,LIPUS能够促进DPSCs的成骨分化,且Trpm7在这一过程中发挥着重要作用。
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