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香鱼IL-12B基因序列及其表达与鳗利斯顿氏菌感染的相关性分析

作者:沈广强; 陈炯; 史雨红; 周前进; 陆新江香鱼鳗利斯顿氏菌基因表达

摘要:白介素-12B(imerleukin-12B,IL-12B)是组成IL-12分子的亚基,参与病原菌感染引起的免疫反应。该研究经香鱼(Plecoglossus altivelis)巨噬细胞转录组测序获得其IL-12B基因,包括完整的开放阅读框在内,序列大小为1 152bp,预测编码的前体蛋白由303个氨基酸组成,N-端22个氨基酸残基为信号肽序列。序列比对及进化树分析表明,香鱼IL-12B与大西洋鲑IL-12B进化关系最近,氨基酸序列同源性达50%。香鱼IL-12B基因mRNA在健康香鱼头肾组织和外周血白细胞中表达量最高,在脾脏、腮和肠等组织也有少量表达。荧光定量PCR分析揭示,鳗利斯顿氏菌(Listonella an-guillarum)感染后,香鱼头肾组织和外周血白细胞IL-12B基因mRNA表达显著上调,12hpi(hours post infection)时达到峰值。随后原核表达了香鱼IL-12B,并制备抗血清。Western blot结果揭示,香鱼血清IL-12B含量在鳗利斯顿氏菌感染后4hpi时尚无显著变化,8hpi后显著上调,并表现持续增加。综上,香鱼IL-12B基因的表达变化与鳗利斯顿氏菌感染过程密切相关,揭示香鱼IL-12B基因可能在病原菌感染引起的免疫反应中发挥重要作用。

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