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香鱼CCL4-like基因的克隆、序列分析及免疫相关性表达变化分析

作者:杨旦阳; 陈炯; 陆新江; 史雨红; 李明云cc型趋化因子香鱼鳗利斯顿氏菌实时荧光定量pcr

摘要:CC型趋化因子是一种多功能的趋化因子,是鱼类先天免疫系统的重要组成部分。该研究通过文库测序方法获得香鱼(Plecoglossus altivelis,ayu)CCL4一like(aCCL—like)基因cDNA序列。它编码一个由123个氨基酸组成的前肽,N.端22个氨基酸为信号肽序列。成熟肽包含4个半胱氨酸残基,可形成2个二硫键。系统进化树分析揭示,aCCL4.1ike与大西洋鲑(8almo salar,atalantic salmon)CCL4亲缘关系最近。实时荧光定量PCR(Real—time quantitative PCR,RT-qPCR)分析揭示,aCCL4.1ike基因mRNA在检测的健康香鱼7个组织中均有表达,其中肝的表达量最高;在鳗利斯顿氏菌(Listonella anguillarum)感染后,各组织中aCCL4一like基因mRNA表达均显著变化,但各时间点变化不一,其中肠组织的变化最为明显。随后原核表达了aCCL4.1ike并制备相关抗血清,Westernblot分析揭示,鳗利斯顿氏茵注射后4h的血清中CCL4.1ike含量无显著变化,8h时显著增加,此后表现为持续增加。综上,aCCL4-like基因的表达变化与鳗利斯顿氏菌的感染过程密切相关,推测aCCL4.1ike可能在香鱼抗病原菌感染的免疫反应过程中有重要作用。

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中国细胞生物学学报

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