作者：段广新; 段卫明; 许雅香; 张燕娟; 周新文mir34a凋亡衰老e2f3
摘要：将合成的miR-34a成熟序列转染p53＋的非小细胞肺癌H1299细胞，探究外源性的miR－34a是否影响p53缺失细胞的生长、凋亡和衰老以及其作用机制。MTT检测细胞的生长与存活，藻红B染色检测细胞的死亡，Annexinv Ｖ/PI染色检测细胞凋亡，β－半乳糖苷酶染色试剂盒检测细胞的衰老，Western blot检测与细胞凋亡和周期相关的Bcl一2、Puma、Cdk4和E2F3蛋白的表达。结果显示，miR一34a转染组和阴性对照组相比，存活率明显降低，且48h较24h更显著，24h和48h存活率分别为79．94％、64．83％；细胞死亡和凋亡的分析结果表明，外源性miR－34a可以促进细胞死亡和凋亡；此外，细胞还出现了明显的衰老。并且检测到凋亡、衰老相关的Bcl．2、Puma、E2F3和Cdk4蛋白的表达下调。miR一34a可以下调p53下游相应靶蛋白的表达，通过部分补救p53通路或p53非依赖途径促进细胞的凋亡、衰老并抑制细胞的增殖。
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