作者:马艳; 丁伟峰; 冯颖; 张欣; 马涛冷冻保护剂冻存时间昆虫细胞细胞活力
摘要:本文分别使用3种不同配方的冻存保护液对甘蓝夜蛾(Mamestra brassicae)5龄幼虫脂肪体细胞系NIAS—MaBr-85进行液氮低温冷冻保存,并在第1、3、9、17、20、28、38个月时检测细胞活力和圆度的变化情况,以评估不同冷冻保护剂和冻存时间对细胞活性的影响。研究发现,NIAS—MaBr-85细胞的冻后活性随着冻存时间的延长而降低。短期冻存时,3种冻存保护液对NIAS-MaBr-85的冻后活性影响不明显,在长期冻存条件下,以10%DMSO作为冻存保护剂的细胞冻后活力和圆度变化幅度明显小于以10%甘油为保护剂冻存的细胞。使用胎牛血清(FBS)替代培养基进行细胞冻存,对保持细胞冻后活性稳定的作用十分有限。因此,10%DMSO是长期冻存NIAS-MaBr-85细胞的优良冻存保护剂。通过对不同冻存时间的细胞活性比较发现,虽然冻存时间的长短对于细胞冻后活力和圆度变化有显著影响,但在昆虫细胞的长期低温保存过程中,冻存保护剂的差异是影响冻后细胞生物学活性的主要因素。
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