作者：田鹏鹏; 陈钟; 黄华; 吴振宇; 沈洪薰; 李...猪内源性逆转录病毒肝细胞猪细胞培养生物人工肝
摘要：建立了猪肝细胞及其培养上清液中猪内源性逆转录病毒(PERV)的检测方法，探讨了其在猪肝细胞生物人工肝应用中的意义。以PERV gag基因为靶序列，选用特定的引物，PCR检测中国实验用小型猪肝细胞PERV前病毒DNA；RT-PCR检测猪、犬、大鼠以及HBV阳性病人血清和猪肝细胞培养6h、24h时的上清液PERV RNA，同时检测猪肝细胞猪线粒体DNA(mtDNA)。研究结果表明：检测5份中国实验用小型猪血清、肝细胞及培养猪肝细胞24h时的上清液PERV均为阳性，而5份培养猪肝细胞6h时的上清液、5份犬血清、5份大鼠血清和5份HBV阳性病人血清PERV检测结果均为阴性，猪肝细胞中均可检测到猪mtDNA。因此，中国实验用小型猪肝细胞携带PERV；PERV可释放到血清中；猪肝细胞培养24h后该病毒颗粒已释放到培养液中；PCR和RT-PCR方法检测PERV具有特异性强、简便的特点。
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