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大肠杆菌感受态细胞转化能力的影响因素

作者:张岚岚; 徐春燕; 徐昌杰大肠杆菌感受态细胞转化能力菌株

摘要:探讨了大肠杆菌菌株、细菌生长状态、转化溶液、抗冻剂及保存时间、质粒长度和纯度对感受态细胞转化能力的影响。结果表明,以100mmol/L CaCl2为缓冲液,采用经活化培养的A600为0.55的TG1制备的感受态细胞,在冰上放置6h后转化,所得转化率最高,可达2×10^6~4×10^7cfu/μg DNA(pUC19)。随着质粒长度增加和纯度降低,转化率有所下降。若感受态细胞要保存备用,以15%甘油为抗冻剂优于7%DMSO,但添加抗冻剂对转化率有抑制作用。贮于甘油的感受态细胞在-70℃冻存两个月后仍有较理想的转化率。

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中国细胞生物学学报

《中国细胞生物学学报》(CN:31-2035/Q)是一本有较高学术价值的大型月刊,自创刊以来,选题新奇而不失报道广度,服务大众而不失理论高度。颇受业界和广大读者的关注和好评。 《中国细胞生物学学报》主要刊载以中文或英文撰稿的细胞生物学、分子生物学及其相关领域具有创新性的基础及应用基础原创性研究论文和反映当前中国国内外生物科学前沿或热点领域的综述性文章。

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