作者：梅建华; 雷永良; 陈秀英; 王晓光; 叶灵; ...数字pcr乙型肝炎病毒绝对定量
摘要：目的建立芯片式数字PCR技术用于乙型肝炎病毒的绝对定量检测，并对此方法的灵敏度、检出限、检测范围开展评估。方法本研究设计了芯片式数字PCR用于乙型肝炎病毒绝对定量检测的引物探针，并对扩增条件、反应的体系进行了优化，采用阴性对照法和稀释法对检出限、检测范围和检测方法的重复性进行评估。同时与实时荧光定量PCR的结果作了平行比较。结果芯片式数字PCR检出限为3．94×104 copies／m]，检测范围是3．94×10^4copies／ml～2．82×107copies／ml，重复性的相对标准偏差（RSD）为2．89％～13．37％。相比较实时荧光定量PCR，对样本的浓度要求苛刻，高稀释倍数与阴性对照均出现阳性。结论本研究建立了芯片式数字PCR技术用于乙型肝炎病毒的绝对定量方法，不必依赖对照品或标准品，可高度耐受PCR反应抑制剂，为乙型肝炎病毒载量的测定提供了一种新的检测手段。
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