作者:张文元; 杨亚冬; 房国坚; 边敏章; 陈勇骨髓基质干细胞冻存技术生物学特性密度梯度离心法兔msc生长曲线增殖能力体外分离分离纯化生长特性冻存复苏dmso倍增时间液氮保存冰箱保存冻存方法培养增殖种子细胞组织工程骨髓液培养法贴壁率成活率
摘要:目的:建立兔骨髓基质干细胞(MSC)体外分离、培养、增殖、冻存的方法,以及探讨其生物学特性.方法:抽取兔髂骨及胫骨的骨髓液,采用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离纯化出MSC,并增殖.观察MSC的生长特性,测定其贴壁率及第3、8、13、18代的生长曲线,并评价其生物学特性.MSC在 12.5% DMSO条件下经液氮或 -60℃冻存复苏,测其成活率.结果:MSC为贴壁生长,以均一的梭形的成纤维细胞样生长,贴壁及增殖能力强,所测各代的生长曲线呈相似的S型,倍增时间约为 35 h.MSC需液氮保存,短期也可 -60℃冰箱保存.结论:获得的兔MSC生长旺盛、增殖能力强,其分离、培养、纯化、增殖、冻存方法是可行的,可较长时间稳定地培养增殖、冻存,传代的MSC可保持其原代的生物学特性.MSC将是组织工程理想的种子细胞.
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