作者：陈彦福; 宋彩霞; 王全; 欧树安; 严明总胰腺癌slug干扰no瘤转移血管生成
摘要：目的探讨siRNA干扰Slug基因表达对胰腺癌转移、血管生成和生长的影响。方法用脂质体转染法将表达siRNA-Slug的真核表达载体pGenesfl-1-Slug-siRNA（pSlug-siRNA）和空载体pGenesil-1-Neg-siRNA（pNeg-siRNA）导入As—PC-1细胞，G418筛选阳性细胞，获得稳定转染的阳性克隆。采用RT-PCR技术检测不同处理组细胞中SlugmRNA表达水平，Western-blot测定Slug蛋白表达水平。观察Slug沉默后及对体外胰腺癌细胞侵袭作用的影响；鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）试验及CAM移植瘤实验检测Slug沉默对血管生成的影响，MTF比色法检测细胞存活率。结果pSlug-siRNA组细胞内Slug表达被有效沉默。重组细胞基底膜（Matrigel）侵袭实验显示，pSlug-siRNA组、对照组、pNeg-siRNA组穿透基底膜细胞数分别为（38±6．56）、（164±15．39）、（159．67±8．96）个／高倍镜（x200），差异分别有统计学意义（P〈0．05）。体外实验表明，AsPC-1细胞内Slug表达沉默后，血管密度明显降低，血管生成被抑制，细胞存活率明显降低。结论RNA干扰Slug基因抑制胰腺癌细胞生长、侵袭转移和血管生成，Slug可能成为胰腺癌基因治疗的新靶点。
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