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荧光实时定量PCR检测线粒体DNA氧化损伤方法初探

作者:孙玉; 张洪海; 柳雅立; 石英; 魏飞力; 吴...线粒体dna氧化损伤荧光实时定量pcr

摘要:目的体外构建DNA氧化损伤模型,荧光实时定量PCR检测线粒体DNA氧化损伤。方法体外应用亚甲蓝联合可见光(MBL)方法建立DNA氧化损伤模型,通过8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)特异性切割氧化损伤位点8-羟基鸟嘌呤(8-oxoG),运用荧光实时定量PCR法检测不同比例混匀的OC,G1酶切与未酶切的DNA氧化损伤模板。结果成功构建体外氧化损伤DNA模型,OGG1酶能特异切割氧化损伤位点;OGG1酶切DNA在定量PCR体系模板中所占比例,与线粒体DNA编码基因COⅡ/扩增ct值呈正相关。结论自制OGG1酶具有良好的生物活性,可以联合荧光实时定量PCR检测DNA氧化损伤。

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中国实验诊断学

《中国实验诊断学》(CN:22-1257/R)是一本有较高学术价值的大型月刊,自创刊以来,选题新奇而不失报道广度,服务大众而不失理论高度。颇受业界和广大读者的关注和好评。 《中国实验诊断学》被中国期刊全文数据库全文收录,中国生物医学文献数据库收录,中文科技期刊全文数据库收录,并于2002年成为科技部中国科技优秀期刊。宗旨是促进临床实验诊断学和临床检验学术交流和发展,评价实验检查在临床医学中的应用,帮助临床各科医师提高应用临床检验和诊断学的分析能力、理论水平、教学和科研素质。

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