作者:肖钟迪; 张玉成; 房学东tslc1转染克隆hepg2细胞周期
摘要:目的将已构建完成的携带增强绿色荧光蛋白基因的TSLC1真核表达载体转染到HepG2细胞中,同时观察其对HepG2肝癌细胞的作用。方法脂质体Lipofectamine2000介导重组载体转染到HepG2肝癌细胞中,经G418筛选建立稳定转染细胞株,分别采用RT-PCR、免疫组化法和westernblot法检测其表达;MaT检测细胞增殖活力,流式细胞仪分析细胞周期。结果与对照组比较,RT.PCR方法可见转染组细胞TSLC1mRNA表达明显增多,免疫组化和westernblot方法可见转染组细胞TSLC1蛋白表达明显增高;MTT检测发现转染组细胞生长缓慢,细胞周期检测发现转染组G0/G1期细胞显著增多,而S期及G2/M细胞明显降低。结论本研究成功建立了稳定转染TSLC1的HepG2细胞株,并证实喃LC1能够抑制细胞生长、阻滞细胞周期。
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