作者：于珍; 王亚非; 李增军; 周征; 徐世才; 邱...造血干细胞移植b细胞恶性肿瘤实时定量pcrigh重排
摘要：本研究评价实时定量PCR（RQ—PCR）技术检测IgH水平对B细胞恶性肿瘤患者造血干细胞移植（HSCT）后残留肿瘤细胞监测的意义。采用家族一致性TaqMan探针联合等位基因特异性寡核苷酸（ASO）上游引物技术检测22例B细胞恶性肿瘤患者HSCT前后骨髓单个核细胞的IgH水平动态变化。IgH水平以内参基因GAPDH进行归一化。结果表明，RQ-PCR实验可重复灵敏度为1个拷贝。9例IgH单克隆重排患者，在HSCT后1个月骨髓中IgH的拷贝数较初治时明显降低（6．67×10^3／10^6 GAPDHI）S29／10^6 GAPDH，P〈0、01）。3例移植后15个月IgH的拷贝数持续小于10^2／10^6 GAPDH，18个月后IgH水平为0的患者获得了完全的临床和分子遗传学缓解（CCyR）；5例移植后3个月以内IgH拷贝数持续小于10^2／10^6 GAPDH，随后IgH拷贝数持续小于10^3／10^6 GAPDH的患者临床获得完全缓解（CR）。1例患者移植后近3个月时IgH拷贝数为4、5×10^3／10^6 GAPDH，4个月时临床复发。RQ—PCR检测8例干细胞采集物的肿瘤污染水平为3、68×10^2（0—1720）／10^6 GAPDH，外周血采集物中的肿瘤污染小于骨髓[75（0—890）／10^6 GAPDHI）S1．1×10^3（527—1720）／10^6 GAPDH，P〈0、05]。采集物可用于RQ—PCR检测的8例患者无论肿瘤污染程度如何，临床均无复发。采集物中肿瘤污染的水平与初治及移植后1个月的IgH水平呈正相关（r值分别为0、810、0．708，P〈0．05）。结论：RQPCR能够有效监测B细胞恶性肿瘤患者移植后IgH水平动态变化。移植后3个月内IgH拷贝数大于10^3／10^6 GAPDH可能是预测患者复发的标志。
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