作者：贾哲; 张才; 吴庭才; 爨淑楠; 邵琦; 陈小...奶牛肝细胞油酸钠脂肪肝细胞模型
摘要：以改进的两步灌流法分离培养的肝细胞为研究对象，使用含油酸钠0，0．10，0．25，0．50，1．00mmol／L的培养基对其诱导处理12h，通过油红0染色和测定细胞内TG（甘油三脂）含量判断肝细胞脂肪蓄积情况，利用CCK-8法检测细胞的活性和测定细胞培养液中ALT、AST的活性判断细胞活性和损伤程度，选取油酸浓度较为适中的组别电镜观察肝细胞超微结构的变化，荧光定量PCR技术检测油酸钠对肝细胞PPARa，SREBP—1c和ChREBP转录水平的影响，结果显示经过消化、纯化获取高纯度、高活性的肝细胞；生化指标及油红O染色结果显示：0．25mm01／L油酸钠在诱导肝细胞12h后对肝细胞损伤较小，肝细胞保持较高活性，且脂滴较明显。电镜观察结果显示：0．25mmol／L组肝细胞线粒体空泡化严重，糖原颗粒较少的现象符合临床脂肪肝病理现象；关键脂氧化基因PPARa的表达水平升高，脂合成基因SREBP-1c、ChREBP表达水平与对照组明显降低。结果表明：油酸钠诱导奶牛肝细胞12h时，0．25mmol／L浓度的油酸钠为最佳建立体外奶牛脂肪肝细胞模型浓度。
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