作者：李赛赛; 郭玉堃; 舒静超; 曾磊; 郭婉莹; ...传染性法氏囊病病毒vp2蛋白融合标签可溶性表达ls3蛋白笼纳米颗粒免疫原性
摘要：为在大肠杆菌中表达出高可溶性的VP2-LS3蛋白笼纳米颗粒并检测其免疫原性，将扩增的7种融合标签（GST、NusA、MBP、PpiB、γ-crystallin、ArsC和Grifin）片段连在VP2-LS3基因的N端，构建7个带有不同标签的重组原核表达载体。再将其分别转化至大肠杆菌BL21（DE3），用IPTG诱导表达，表达产物经SDS—PAGE电泳分析，筛选出显著促进VP2-LS3蛋白可溶性表达的融合标签，并进行大量诱导表达、纯化。纯化得到的VP2-LS3重组蛋白分别进行TEV酶酶切、电镜观察分析及免疫家兔，并对获得的兔抗VP2血清进行Western blot和间接ELISA分析。结果显示，与其他6个标签相比，MBP标签促进VP2-LS3蛋白的可溶性表达具有显著性，可溶性表达水平达到69．5％；TEV酶可以把His6-MBP标签蛋白与VP2-LS3蛋白分开，获得高纯度的VP2-LS3蛋白；镜检显示形成了LS3蛋白笼纳米颗粒；Western blot结果表明，表达的VP2-LS3重组蛋白可与兔抗血清发生特异性反应，而不与阴性对照血清发生反应；间接ELISA检测制备的兔抗VP2血清效价达到1：12800。本研究获得了高可溶性的VP2-LS3蛋白笼纳米颗粒，为传染性法氏囊病病毒（IBDV）基因工程疫苗的研发奠定基础。
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