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维氏气单胞菌TH0426株主要黏附素基因的克隆、生物信息学分析及原核表达

作者:许瑞; 田佳鑫; 张冬星; 康元环; 安鼎杰; ...维氏气单胞菌黏附素ahal基因原核表达生物信息学分析

摘要:为研究维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)主要黏附素Ahal基因的生物信息学特性,本试验克隆了A.wronii TH0426主要黏附素Ahal基因片段,构建了Ahal基因序列进化树,通过生物信息学软件分析其编码蛋白的理化性质、疏水性、信号肽、跨膜区、二级结构及三级结构,并进行了Ahal蛋白的原核表达及免疫原性的检测。结果显示:Ahal基因全长1038bp,编码345个氨基酸。TH0426株Ahal与A.veronii属同一分支,具有信号肽,跨膜区,二级结构以8折叠、无规则卷曲为主。SDS-PAGE及Western blot分析结果显示,Ahal蛋白在大肠杆菌中成功表达且其能被鼠抗黏附素阳性血清识别,表明Ahal蛋白具有一定的反应原性。以上结果为进一步研究Ahal蛋白的结构功能Ahal基因工程亚单位疫苗的制备奠定了基础。

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