作者:李小康; 张巫凡; 杨静; 郭香玲; 王臣鸭坦布苏病毒e蛋白鸭胚成纤维细胞噬菌体展示抑制肽
摘要:鸭坦布苏病毒(DTMUV)是一个新发现的病毒,主要引起鸭产蛋严重下降为特征,为鉴定与DTMUV囊膜E蛋白特异性结合的多肽,本试验利用噬菌体展示技术以DTMUVHN1株E蛋白为靶标,进行随机12肽库3轮筛选,结合ELISA试验和竞争抑制试验,成功筛选了2个能够与DTMUVHN1株E蛋白特异性结合的多肽。测序结果显示,其氨基酸序列分别为:HWSTRQGSTRWN(P3—12)和THRSWQGNswYM(P8—12)。进一步分析多肽P3—12和P8—12对DTMUV在鸭胚成纤维细胞增殖方面的影响,结果显示,E蛋白抑制肽P3—12和P8—12本身对鸭胚成纤维细胞的增殖无明显影响,不同质量浓度的的抑制肽P3—12和P8—12(0.02、0.2、2、20mg/L)均能显著降低DTMUV在鸭胚成纤维细胞中的病毒滴度和病毒拷贝数,以上结果表明,抑制肽P3—12和P8—12均能抑制DT—MuV在鸭胚成纤维细胞的增殖,本试验为进一步探明DTMUV与宿主的相互作用及抗病毒制剂的开发提供了理论依据。
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