作者：郭振刚; 金海国; 曹阳; 孙福亮; 张明新; ...新吉细毛羊toll样受体8克隆序列分析
摘要：为了解绵羊Toll样受体8（TLR8）蛋白的结构特征和进化关系。本试验采用Trizol法提取新吉细毛羊肝脏组织总RNA，设计ORF区两端兼并引物，RT-PCR方法克隆新吉细毛羊TLR8并进行了系统的生物信息学分析。RT—PCR结果显示，试验获得了大小为3102bp的片段，包括完整的ORF区2982bp，编码993个氨基酸（GenBank序列号为：GU936186和GU936187），含15．7％的亮氨酸。同源分析结果显示，TLR8在进化过程中具有高度保守性，与人、家牛、山羊、猪、梅花鹿和小鼠的氨基酸序列同源性分别为79．9％、96．3％、97．6％、84．7％、96．5％和74．2％。蛋白分子功能结构域预测显示，该分子由胞外区（781个氨基酸）、跨膜区（52个氨基酸）和胞内区（160个氨基酸）组成，其中胞外区具有LRR结构域，胞内区具有TIR结构域，且绵羊较人类多了LRR3和LRRl2结构域。进化分析显示TLR8分子与不同物种间的进化关系符合真实物种间的进化顺序。试验结果表明新吉细毛羊TLR8分子具有病原分子模式识别作用，为其结构和功能的研究奠定了基础。
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