作者:陈萍; 刘军; 祝令伟; 孙洋; 郭学军; 齐翀...大肠杆菌o157融合基因构建出血性融合蛋白氨基酸残基总蛋白含量单克隆抗体亚单位疫苗重组质粒诱导表达iptg电泳检测page高效表达目的蛋白薄层扫描e基因sds表达量分析表c端
摘要:构建表达eae和stx1/2B的融合基因,克隆eae基因的C端280个氨基酸残基(Int280)基因部分,以正确地阅读框定向插入到含有stx1/2B融合基因的质粒,构建重组质粒,将其转化于BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳检测,该融合蛋白获得了高效表达.薄层扫描分析表明:目的蛋白表达量占菌体总蛋白含量的50.67%.由于该融合蛋白由eae、stx1B、stx2B等三部分抗原组成,可刺激机体产生针对紧密素和StxB的抗体,在E-HEC O157亚单位疫苗设计或单克隆抗体抗制备中具有重要价值.
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