作者：彭贵青; 陈焕春; 钱平基因克隆原核表达ifn包涵体白细胞梅山猪fmdv总dna
摘要：利用PCR技术从中国梅山猪白细胞总DNA中扩增出猪β干扰素基因(MS-IFNβ).将PCR产物克隆至pMD18-T载体,利用双脱氧末端终止法测定了全基因的核苷酸序列.序列分析表明,β干扰素基因全长561 bp,编码186个氨基酸,与GenBank中S41178的序列同源性达99%,在128、177位核苷酸处发生了点变异,由G变为A,T变为C,但仅导致43位氨基酸由G变为E.在此基础上,合成了1对引物,通过PCR方法将编码成熟蛋白基因亚克隆到pGEX-KG表达载体,转化宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导后,得到高效表达,所表达蛋白质的大小约为47000,占总蛋白的23%.表达产物主要为不溶性的包涵体,包涵体经提纯后,能够抑制口蹄疫病毒(FMDV)增殖.
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
