作者：覃宗华; 谢明权; 蔡建平; 艾哈迈德; 彭新...大肠杆菌表达micet重组蛋白基因重组抗原分析后广东株毒害艾美耳球虫特异性引物
摘要：根据克隆的毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)广东株微线蛋白-2基因(EnMIC-2(Gd))的cDNA序列设计特异性引物,用PCR方法扩增其阅读框架(ORF)后,克隆至质粒表达载体pET-32a(+),成功构建了重组表达质粒pET-32a(+)-EnMIC-2.用CaCl2法将其转化至宿主细菌E.coliBL21(DE3),并用IPTG成功诱导了EnMIC-2重组抗原在大肠杆菌表达.表达的重组蛋白约占菌体总蛋白的10.8%,其相对分子质量约为55000.重组蛋白经SDS-PAGE分析后,用E.necatrix(广东株)感染鸡的高免血清进行Western Blotting分析,结果为阳性.
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