作者：孙蕾; 吴艳涛; 张体银; 陈素娟; 刘秀梵鸡痘病毒表达载体新城疫病毒f基因hn基因疫苗
摘要：利用分子克隆技术对本室构建的高效鸡痘病毒表达载体p11S进行改造,在其人工合成禽痘病毒(FPV)强启动子Ps的下游引入含7个单一酶切位点的多克隆位点(MCS),构建了便于外源基因插入的通用性更强的高效单表达载体pN11S.然后将FPV早晚期启动子PE/L及其启动的鹅源新城疫病毒NDV ZJ1株的F基因一并插入pN11S中,使PE/L与Ps反向串联,从而构建出1个含NDV ZJ1株F基因的重组FPV高效双表达载体pN11SEF,其MCS可以用于插入其他外源基因.在此基础上,将NDV ZJ1株的HN基因插入pN11SEF的Ps启动子下游的MCS中,构建了共表达NDV ZJ1株F和HN基因的重组FPV双表达载体pN11SEFHN.将pH11SEFHN质粒DNA与FPV 282E4株共转染CEF,得到共表达NDV ZJ1株和HN基因的重组FPV,间接免疫荧光实验初步证明外源基因得到了较好的表达.表明所构建的通用高效FPV表达载体有利于高效基因工程活载体疫苗的研制,具有广阔的应用前景.
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