作者:陈平; 陈素娟; 彭大新; 刘秀梵表达h9亚型禽流感病毒ha基因重组鸡痘病毒免疫效力
摘要:将禽流感病毒血凝素H9A基因克隆入插入载体pFG11S中,通过酶切鉴定获得了正向转移载体pFG11SHA;将其与禽痘病毒疫苗株(wFPV)共转染鸡成纤维细胞(CEF),通过蓝白斑筛选纯化得到重组病毒rFPV-Ps-HA;以间接免疫荧光法证实HA基因得到了表达.将该病毒经颈部皮下免疫1日龄SPF鸡,免疫后15 d以H9亚型禽流感病毒F株翅静脉攻毒,攻毒后第5天采集泄殖腔棉拭子样品进行病毒分离.将此重组病毒与以痘苗病毒P7.5启动子表达相同基因的重组病毒rFPV-P7.5-HA作比较,结果表明,rFPV-Ps-HA相对于rFPV-P7.5-HA明显抑制了病毒的排出;攻毒后第2、5、7、9、11天分别对rFPV-Ps-HA、油乳剂灭活苗免疫鸡进行泄殖腔、气管排毒规律的检测,发现疫苗组均能很好地抑制排毒,攻毒对照组泄殖腔的排毒率明显高于气管排毒率.
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