作者:李乾学; 张锦霞; 吴永魁; 张立树; 栾新红差异显示mrna银染致突变
摘要:为建立在药物致突变研究中应用银染mRNA差异显示的方法,试验提取未经过/经过环磷酰胺处理的Balb/c小鼠肝组织的总RNA,并以此为模板,采用dT12CG、dT12AG、dT12GG为锚定引物,通过反转录、差异显示PCR反应,以6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离差异条带,回收后将其再扩增.结果表明,RNA投入量为3 μg、镁离子浓度为1.5~2.0mmol/L、退火温度为40℃时,扩增的片段条带清晰、背景低,差异条带明显,再扩增条带单一.银染mRNA差异显示技术可成功应用于药物致突变的研究.
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