作者:卢强; 李连瑞; 付宝权; 吴秀萍; 石建平; ...嗜水气单胞菌气溶素表达
摘要:根据GenBank中致病性嗜水气单胞菌气溶素(Aer)基圃的序列设计引物,以国内嗜水气单胞菌分离株为模板,扩增出Aer基因的全长序列.经T载体克隆和序列测定,证实克隆了国内分离株的不含信号肽的Aer全长基因.将该基因以正确的读码框架与表达载体pET28b连接,经lPTG诱导、SDS-PAGE检测,外源基因获得高效表达.诱导4 h的培养物中,融合蛋白的表达占菌体总蛋白含量的48.57%.Western-印迹结果显示,利用纯化包涵体制备的兔抗血清可以很好地识别嗜水气单胞菌产生的天然毒素,而且天然毒素制备的抗体也能识别纯化的重组毒素.
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