作者：韩雅玲; 赵昕; 闫承慧; 康建; 张效林; 邓...启动子生物信息学wtp53阻遏蛋白e1a表型
摘要：目的对人类腺病毒5型早期区域1A（adenovirustype5earlyregion1A，E1A）激活基因阻遏子基因（cellularrepressorofElA—stimulatedgenes，hCREG）启动子进行生物信息学分析、预测hCREG启动子位置和转录因子结合位点。方法对2005年1月至7月沈阳军区总医院全军心血管病研究所进行的从Genbank中获得hCREG的全长编码基因，利用FirstEF程序分析软件分析并获得hCREG的启动子序列，利用Motif软件对启动子序列中的转录因子结合位点进行预测。免疫荧光染色和Westernblot分别观察相关转录因子的蛋白表达与细胞内hCREG蛋白及细胞表型转化之间的关系。结果用FirstEF软件测定长度为945bp的hCREG启动子序列，hCREG的启动子区可能定位于转录起始点上游-109～-359bp。用Motif软件预测启动子区域共含有80多个转录调控因子结合位点，其中肿瘤抑制基因wtp53结合位点为-456bp。进一步应用蛋白质印迹（westernblot）和免疫荧光染色分析wtp53与细胞表型转化的关系。在0．5％胎牛血清（fetalbovinesel-um，FBS）培养的HITASY细胞wtp53表达较10％FBS培养HITASY细胞明显增加。同时，hCREG蛋白和平滑肌细胞分化标志蛋白SMOα-actin亦表达增多。结论获得了hCREG启动子的转录调控信息，推测出wtp53是hCREG基因转录的重要调控因子，它可能结合于hCREG启动子区，参与hCREG蛋白对VSMCs表型转化的调控。
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