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应用高效表达汉坦病毒S基因蛋白建立流行性出血热患者血清学特异性诊断

作者:杨桦; 鲁润铭; 赵新艳; 林松; 刘桂芬; 毛...流行性出血热汉坦病毒特异性诊断基因蛋白高效表达血清学患者杆状病毒系统融合表达载体基因组核酸核衣壳蛋白pcr技术病毒颗粒免疫原性诊断抗原hfrs初步应用痘苗病毒原核系统临床情况rnas片段基因分

摘要:汉坦病毒是分节段病毒,其基因组核酸由三段负链RNA组成,即大(L)、中(M)和小(S)3个片段.引起流行性出血热(HFRS).S片段编码核衣壳蛋白(NP),其在病毒颗粒中含量高,免疫原性强,是HFRS的理想诊断抗原.国内外对S基因分别在原核系统杆状病毒系统和痘苗病毒中进行了表达和初步应用[1,2].我国目前应用于临床情况,仍然缺少一种更为简便、敏感、特异性好的方法.本实验2002-06~2003-10应用PCR技术将S基因完整扩增,并将其与融合表达载体PGEX-6P-1重组,获得表达特异S抗原的融合蛋白,以重组蛋白为包被抗原,建立间接酶联免疫吸附实验(ELISA)法,检测患者血清中IgG抗体,用于临床协助诊断.

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