作者：杜伯强; 杨自军; 赵红先; 张才; 汪纪仓; ...钼肾小管上皮细胞细胞骨架mtt氧化损伤免疫印记实时荧光定量pcr
摘要：为研究钼（Mo）对小鼠肾小管上皮细胞的抗氧化功能及细胞骨架蛋白的影响,以小鼠原代肾小管上皮细胞为试验材料,通过向细胞培养基中添加0、0.1、0.2、0.4、0.8 mmol/L不同浓度的Mo并培养24 h,用MTT法测定Mo对肾小管上皮细胞活力的影响,比色法测定氧化损伤程度,实时荧光定量PCR和Westernblot对细胞骨架蛋白Vimentin、α-actin、β-actin的m RNA和蛋白的表达进行测定。结果显示,与对照组（Mo剂量0组）相比,试验组（Mo剂量0.1、0.2、0.4、0.8 mmol/L组）小鼠细胞内的SOD和T-AOC均有下降（P〈0.01）,而MDA升高（P〈0.01）,LDH含量随Mo剂量的增加呈先下降后上升趋势（P〈0.01）,CAT含量随Mo剂量的增加呈先上升后下降趋势（P〈0.01）;同时,与对照组相比,试验组Vimentin、α-actin、β-actin的mRNA和蛋白的表达均随Mo剂量的增加而下降（P〈0.01或P〈0.05）。结果表明,高于0.4 mmol/L浓度的Mo作用24 h后,小鼠肾小管上皮细胞抗氧化能力受到抑制并加剧了细胞的氧化损伤,同时还会抑制Vimentin、α-actin、β-actin的mRNA和蛋白的表达。
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