作者：李亚颖; 崔克; 庞峰; 李国华; 彭冬梅; 赵...绵羊山羊口疮病毒orf020基因原核表达蛋白纯化
摘要：根据Gen Bank中口疮病毒ORF020基因序列,利用DNAMAN软件设计引物,以口疮病毒基因组为模板,采用PCR扩增出552bp的目的基因片段。凝胶回收纯化目的片段,将其连接入p MD20-T载体,转化E.coli DH5α并测序。测序正确后再其再连接入p ET-28a（＋）表达载体,构建重组质粒p ET28a（＋）-ORF020,转化入E.coli BL21（DE3）,经IPTG诱导表达,并用SDS-PAGE和Western-blot鉴定诱导表达的目的蛋白,镍亲和层析纯化目的蛋白。结果表明,成功构建了原核表达载体p ET28a（＋）-ORF020,并在E.coli BL21中表达了ORF020基因,诱导得到的融合蛋白与目的蛋白大小一致,证明目的基因被成功表达并得到纯化蛋白。上述研究结果为开展ORF020的功能研究奠定了一定基础。
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