作者：韩国全 郭万柱 王印 徐志文 朱玲 林华 张...内江猪白细胞介素15基因分子克隆表达免疫增强作用
摘要：参照GenBank中猪IL-15基因的mRNA序列设计1对特异性引物，从经由刀豆蛋白A诱导培养的内江猪外周血淋巴细胞扩增猪IL-15基因；构建其成熟肽原核表达载体pMAL—pIL-15，在Rosetta（DE3）pLysS中表达；构建其真核表达载体pCI—pIL-15，与pCI—gD（PRV）联合免疫雌性BALB／c小鼠以研究其免疫增强作用。测序结果显示，内江猪IL-15基因与发表的猪IL-15基因的核苷酸同源性为97％～99％，含489bp的完整开放阅读框。SDS—PAGE分析显示，表达的融合蛋白约为52．5ku，约占菌体总蛋白的27％。Western—blot检测显示，所表达的融合蛋白为麦芽糖结合蛋白的融合蛋白。MTT法试验证实，该融合表达产物经初步纯化、透析复性后，可明显增强淋巴细胞增殖；小鼠免疫试验显示，pCI—pIL-15能够促进小鼠脾CD4^＋、CD8^＋T细胞增殖，加强PRV—gD基因疫苗特异性中和抗体的产生。
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