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多头带绦虫TPx基因片段的克隆及原核表达

作者:李永光 李文卉 李航 盖文燕 王鸿盛 姚菊...多头带绦虫多头蚴硫氧还蛋白过氧化物酶重组蛋白免疫原性

摘要:从自然感染的病羊脑内采集多头蚴原头节,提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶(TmTPx)基因片段,PCR产物连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5α后测序,发现克隆到的TmTPx基因片段开放阅读框为453bp,编码150个氨基酸。对TmTPx基因片段进行限制性酶切后连接到表达载体pGEX-4T-1,构建重组表达质粒pGEX-4T-TmTPx,转化大肠杆菌DH5α后筛选阳性克隆,经限制性酶切分析、PCR及测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21,以IPTG进行诱导表达,用SDs-PAGE分析表达产物。结果显示,成功表达了大小约为43ku的融合蛋白。对表达产物纯化后免疫家兔,采集血清用ELISA测定抗体效价,发现兔抗TmTPx重组蛋白的抗体能够与多头蚴原头节抗原发生特异性反应,说明该重组蛋白具有较好的免疫原性。

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中国兽医科学

《中国兽医科学》(CN:62-1192/S)是一本有较高学术价值的大型月刊,自创刊以来,选题新奇而不失报道广度,服务大众而不失理论高度。颇受业界和广大读者的关注和好评。 《中国兽医科学》办刊宗旨是传播兽医理论,推广科研成果,交流临床经验,普及兽医知识,提高诊疗技术,反映兽医科学研究现状,进展和水平,探讨新的兽医学理论和研究方法。

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