作者:张福良; 宋长绪; 朱道中; 徐维加猪圆环病毒1型实时荧光定量pcrtaqman探针
摘要:采用PCR方法克隆了猪圆环病毒1型(PCV1)ORF2基因,构建了重组质粒pMD-ORF2并将其作为标准阳性模板。通过对反应条件进行优化,以定量的10倍系列稀释的质粒pMD-ORF2为标准品进行荧光定量PCR扩增,建立了检测PCVl的荧光定量PCR方法。结果显示,该方法的检测灵敏度可达1.0×10^1拷贝/μL;对起始浓度为1.0×10^7、1.0×10^5、1.0×10^5拷贝/μL标准品的最终实际测得值分别为1.001×10^7、0.869×10^6和0.988×10^5拷贝/μL,变异系数分别为4.758%、1.865%和3.836%。表明,此方法具有良好的准确性和重现性。
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