作者：曾文渊; 张洪友; 夏成; 连学昭; 吴凌; 张...孕酮免疫抗原检测抗原酶联免疫吸附试验
摘要：采用二环已基碳化二亚胺偶联法将孕酮-11α-半琥珀酸酯（11α-OH-P4-HS）分别与牛血清白蛋白（BSA）、卵清白蛋白（OVA）载体偶联,制备乳牛孕酮人工抗原P4-BSA和P4-OVA,并用SDS-PAGE对制备的人工抗原进行测定.再用制备的人工免疫抗原P4-BSA免疫BALB/c小鼠制备免疫血清.用P4-OVA作为ELISA检测抗原,方阵滴定法确定检测抗原的最佳包被浓度,间接ELISA测定免疫血清中抗体的特异性及效价.结果表明,成功制备了乳牛孕酮人工抗原,P4-OVA的最佳包被浓度为5.82×10^-5 ng/mL,最佳封闭液为50 mL/L的羊血清,免疫血清具有良好的特异性.
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