作者：谢芝勋; 庞耀珊; 邓显文; 唐小飞; 刘加波h5亚型h7亚型禽流感病毒多重反转录聚合酶链反应快速检测方法快速鉴别方法
摘要：参考禽流感病毒(AIV)M基因和HA基因序列设计了3对引物,其中1对为针对不同HA亚型AIV的通用引物,另外2对为分别针对AIV H5和H7亚型的特异性引物.这些引物所扩增的cDN段大小分别为244、860和634 bp.利用这3对引物,通过对多重RT-PCR扩增条件的优化,成功建立了快速检测鉴别AIV H5、H7亚型的多重RT-PCR技术.特异性和敏感性试验结果表明,该技术对AIV H5亚型同时扩增出2条大小分别为244 bp和860 bp的cDN段;对AIV H7亚型同时扩增出2条大小分别为244 bp和634 bp的cDN段;对AIV H5和H7亚型混合样品能同时扩增出3条大小分别为244、860和634 bp的cDN段;对其他AIV HA亚型只扩增出1条244 bp的cDN段;对其他常见禽病病原扩增均为阴性;该多重RT-PCR对AIV RNA、AIV H5和AIV H7亚型RNA的最低检出量分别为10、100和100 pg.
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