作者：龙进学; 郝贵杰; 唐应华; 刘秀梵h5n1亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体制备间接免疫荧光试验
摘要：采用活病毒免疫,常规杂交瘤融合的方法,获得了4株针对H5N1亚型禽流感病毒(AIV)A/duck/Shandong/093/2004(A/D/SD/04)株血凝素(HA)的单克隆抗体:A8E8、D2F8、A8C8和C3G4.其中A8E8可以与11株不同来源的H5N1 AIV发生交叉免疫抑制性反应(HI),具有广谱性.采用间接免疫荧光试验(IFA),用A8E8单克隆抗体测定A/D/SD/04株对COS-1和MDCK 2种细胞的半数感染量(TCID50),结果显示,A/D/SD/04株在COS-1上的TCID50为10-5.33/0.1 mL,在MDCK上的为10-7.33/0.1 mL.将编码A/D/SD/04株的HA基因质粒与PR8质粒共转染COS-1细胞后,用A8E8进行IFA,能观察到特异性绿色荧光,这与鸡胚接种结果相符.表明,用此单克隆抗体能准确地检测到H5重组病毒.
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