作者：王凤雪; 王云峰; 智海东; 王玫; 童光志鸡胚致死孤儿病毒fiberl基因原核表达抗原活性诊断试剂盒包涵体肝炎
摘要：根据鸡胚致死孤儿(CELO)病毒Phelps株的fiberl基因(GenBank序列号u46933)序列设计了1对引物，采用PCR扩增CELO病毒fiberl基因C端(包含Knob—S区)的部分片段，并将其克隆到质粒表达载体pGEX-6P—1，获得的阳性克隆命名为pGEX—AF807。序列分析表明，所获得的DN段核苷酸序列与CELO病毒Phelps株的fiberl基因序列完全一致。将pGEX—AF807转化大肠埃希氏菌DH5a，经37C、0．6mmol／L IPTG诱导表达5h，SDS—PAGE分析超声裂解后的上清和沉淀。结果显示，目的蛋白以包涵体形式存在，蛋白分子质量约为54．6ku，目的蛋白量占菌体总蛋白的35．7％。用CELO病毒多克隆血清做Western blotting试验，结果表明目的蛋白具有较好的抗原活性。
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