作者：朱军莉; 余旭平; 时晗; 吴海波; 金俊杰; ...猪圆环病毒复合pcr检测方法多系统衰竭综合征同源序列
摘要：根据已发表的PCV-1和PCV-2全基因组序列,设计了3条引物,组成PCV-2的特有引物对和PCV-1、PCV-2的共有引物对,分别扩增长度为472bp和339bp的片段.为验证PCR扩增的特异性,将472bp的扩增产物纯化后,克隆到pMD 18-T载体,转化大肠埃希氏菌TG1,对阳性克隆进行酶切及PCR鉴定,并测序.将该序列递交NCBI进行BLAST同源序列比较,发现它与美国、加拿大及我国台湾的PCV-2毒株核苷酸序列的同源性均在99%以上,与PCV-1毒株的同源性为86%.结果显示,该方法最少可用于3μg病料组织和0.75pg DNA的PCV-2检出,具有很高的灵敏性.应用该PCR方法检测了浙江省和上海市47份"猪高热综合征"病料,PCV-2感染阳性率为36.17%,PCV-1单独感染阳性率为34.04%.
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